背景说明
野生稻作为亚洲栽培稻的近缘祖先种,是稻种资源的重要组成部分、水稻杂交育种工作中最为重要的材料,具有许多珍贵的优良性状,是保证粮食安全的重要因素,具有较高的研究、开发与利用价值。在转基因水稻大面积种植之后,转基因向野生稻转移将是不可避免的大概率事件,对携带外源转基因野生稻的安全性进行评估,对于保障野生稻资源和生态安全都具有重要意义。为了更好的利用野生稻资源,利用植物遗传转化来研究基因和基因组功能已成为必不可少的技术环节。
服务流程
服务内容及说明
使用我司已被授权的专利——LY培养基(专利号:ZL200910273352.3),以成熟胚作为受体材料,用携带目标基因载体的农杆菌侵染受体材料,将T-DNA插入到基因组中,经过对应抗性的抗生素筛选,获得独立的抗性愈伤组织,进一步分化并再生为遗传转化株系。
技术优势
1、我司拥有多年从事植物遗传转化的专业技术团队,可保障实验成功率。
2、高效的实验流程。优化的成熟胚转化体系,可随时开展遗传转化项目;采用农杆菌转化法,快速、高效、稳定、单拷贝插入为主,支持潮霉素、G418、Basta、草甘膦、甘露糖等多种真核抗性筛选。
3、完善的服务支持。前期提供专业的技术咨询和指导,优化项目;实验中随时沟通交流,及时了解进展;项目完成后根据合同提供约定的结果。
4、我司提供野生稻繁种服务,特别适合无暇管理繁种工作或遇特殊季节无法进行繁种的客户。
备注
1、客户可直接提供构建好的野生稻转化载体,也可委托本公司进行相关载体构建服务。
客户提供质粒要求:
• 浓度:80-100ng/μL;
• 体积:≥10μL;
• 质粒无降解。
注:质粒出现降解会影响后续实验,运输过程中可加冰袋或干冰避免此类问题。
客户提供大肠杆菌要求:
• 大肠杆菌菌液或菌板均可。菌液:1年以内的菌液,加甘油保存;菌板:一周内活化的菌板。
客户提供农杆菌要求:
• 农杆菌菌液或菌板均可。菌液:1年以内的菌液,加甘油保存;菌板:一周内活化的菌板。
注:推荐客户提供质粒,大肠杆菌和农杆菌在邮寄过程中很容易发生污染。
2、需提供一年以内成熟种子≥30g。
3、如客户指定受体材料为突变体或其他特殊品种,需增加实验时间,并另行协商具体服务事项。
4、我司提供独立的转基因株系,以抗性基因PCR鉴定阳性结果作为结题标准;对于基因编辑苗我司提供阳性转基因株系的具体突变信息。
可转品种
普通野生稻O. mfipogon Griff.、非洲栽培稻O. glaberrima、东乡野生稻O. rufipogon Griff.、非洲长雄蕊野生稻O. longistaminata
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://plant.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写农杆菌菌株名称、载体抗性、受体材料所属物种(野生稻)等信息,价格由系统自动计算。
实验信息
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知,实验过程中客户可以随时登录客户管理系统査看项目实时进展情况。实验结题后,实验报告、检测结果可在线査看,并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。
实验结题标准
阳性对照有正确的条带且阴性对照无条带。
实验交付结果
1、每个标准转化按照以下表格提供PCR阳性鉴定株系(真核抗性基因),也可以根据客户要求提供任意数量的独立转化株系,多岀部分根据实际情况进行收费;
①胶图:白底胶图,条带单一,无杂带。阳性菌亮,阴性苗与阴性水不亮,阳性苗与阳性菌条带一致,检测苗子棵数正确。
②检测表格完整:包含检测编号,阳性苗编号,阳性总数,阳性率。
③检测引物、载体序列等信息完整。
2、实验数据及图片;
3、该项目的实验报告。